Metoda
mrazových lomů Metoda
mrazových lomů a mrazového leptání je speciálním kryotechnickým
postupem elektronové mikroskopie, který se užívá k zobrazování především
membránových systémů buňky.
Princip
metody: hluboce zmražená buňka je ve vakuu rozlomena a z lomné plochy se
zhotoví platino-uhlíková replika (otisk), kterou pozorujeme prozařovacím
elektronovým mikroskopem. Mrazové leptání se od lomů liší tím, že před
zhotovením repliky se ze zmrazené plochy odsublimuje trocha ledu. Protože
lomné plochy probíhají většinou mezi oběma vrstvami membránových
lipidů, jsou dobře znázorněny detaily vnitřních ploch a po sublimaci i
svrchní plochy membránových struktur (např. endoplazmatického retikula,
plasmatické membrány aj.).
Metoda
se uplatňuje při studiu vývoje a regenerace biomembrán, exocytózy,
endocytózy, účinků farmak na buňku atd.
Fotogalerie
|
Dělící se buňka kvasinky Saccharomyces
cerevisiae. Je vidět jádro (J), vakuola (V), tukové kapky (L), buněčná
stěna (BS). Mrazový lom, platino-uhlíková replika. Mikroskop TESLA BS
500. Zvětšení 21 200x. (O. Nečas) |
|
Ultrastruktura kvasinkových
protoplastů v počátečním stádiu jejich splynutí. Jsou vidět jádra
(J), vakuoly (V) a hranice mezi jednotlivými protoplasty tvořené
plazmatickými membránami (PM). Mrazový lom, platino-uhlíková
replika. Mikroskop TESLA BS 500. Zvětšení 14 200x. (A. Svoboda) |
|
Ultrastruktura adiaspory. Jádro
s póry a částí Golgiho komplexu. Mrazový lom, platino-uhlíková
replika. Mikroskop TESLA BS 500. Zvětšení 63 500x. (M. Hejtmánek, O.
Nečas a R. Janisch) |
|
Detail povrchu plazmatické
membrány protoplastu kvasinek. Mrazový lom, platino-uhlíková replika.
Mikroskop TESLA BS 500. Zvětšení 127 000x. (M. Kopecká) |
|
Část cytostomu nálevníka Tetrahymena
pyriformis. Mrazový lom. Mikroskop TESLA BS 500. Zvětšení
92 900x. (R. Janisch) |
|
Lom buňkou sinice Nodularia
spumigena. Mrazový lom, platino-uhlíková replika. Mikroskop TESLA
BS 500. Zvětšení 49 300x. (J. Šmarda) |
|